Ang mga tigdukiduki nga Dutch naghiusa sa CRISPR ug bioluminescence sa usa ka eksperimento nga pagsulay alang samakatakod nga mga sakit

Ang usa ka bag-ong naugmad nga protina sa gabii makapadali ug makapasimple sa pagdayagnos sa mga sakit nga viral, sumala sa mga tigdukiduki sa Netherlands.
Ang ilang pagtuon, nga gipatik kaniadtong Miyerkules sa ACS Publications, naghulagway sa usa ka sensitibo, usa ka lakang nga pamaagi alang sa paspas nga pag-analisar sa mga viral nucleic acid ug ang ilang hitsura gamit ang naggilakgilak nga mahayag nga asul o berde nga mga protina.
Ang pag-ila sa mga pathogen pinaagi sa pag-ila sa ilang nucleic acid fingerprints usa ka importanteng estratehiya sa clinical diagnostics, biomedical research, ug food and environmental safety monitoring.Ang kaylap nga gigamit nga quantitative polymerase chain reaction (PCR) nga mga pagsulay sensitibo kaayo, apan nanginahanglan ug sopistikado nga pag-andam sa sample o interpretasyon sa mga resulta, nga naghimo niini nga dili praktikal alang sa pipila nga mga setting sa pag-atiman sa kahimsog o mga setting nga limitado sa kapanguhaan.
Kini nga grupo gikan sa Netherlands mao ang resulta sa usa ka kolaborasyon tali sa mga siyentipiko gikan sa mga unibersidad ug mga ospital sa pagpalambo sa usa ka paspas, madaladala ug sayon-sa-gamiton nga nucleic acid diagnostic nga pamaagi nga mahimong magamit sa lain-laing mga setting.
Giinspirar sila sa mga pagkidlap sa alitaptap, pagkidlap sa alitaptap, ug gagmay nga mga bituon sa aquatic phytoplankton, ang tanan gipaandar sa usa ka panghitabo nga gitawag og bioluminescence.Kini nga glow-in-the-dark nga epekto gipahinabo sa kemikal nga reaksyon nga naglambigit sa luciferase protein.Gilakip sa mga siyentista ang mga luciferase nga protina sa mga sensor nga nagpagawas sa kahayag aron mapadali ang pag-obserba kung makakita sila og target.Samtang kini naghimo niini nga mga sensor nga sulundon alang sa point-of-care detection, sila sa pagkakaron kulang sa taas nga pagkasensitibo nga gikinahanglan alang sa clinical diagnostic tests.Samtang ang pamaagi sa pag-edit sa gene sa CRISPR makahatag niini nga kapabilidad, nagkinahanglan kini og daghang mga lakang ug dugang nga espesyal nga kagamitan aron mahibal-an ang huyang nga signal nga mahimong anaa sa komplikado, saba nga mga sample.
Nakaplagan sa mga tigdukiduki ang usa ka paagi aron makombinar ang usa ka protina nga may kalabotan sa CRISPR nga adunay usa ka signal nga bioluminescent nga mahimong makit-an sa usa ka yano nga digital camera.Aron masiguro nga adunay igo nga sample sa RNA o DNA alang sa pag-analisar, ang mga tigdukiduki naghimo sa recombinase polymerase amplification (RPA), usa ka yano nga teknik nga naglihok sa kanunay nga temperatura nga hapit 100 ° F.Naghimo sila og usa ka bag-ong plataporma nga gitawag og Luminescent Nucleic Acid Sensor (LUNAS), diin ang duha ka CRISPR/Cas9 nga mga protina espesipiko alang sa lain-laing nagkadugtong nga mga bahin sa viral genome, ang matag usa adunay talagsaon nga luciferase fragment nga gilakip niini sa ibabaw.
Kung naa ang espesipikong viral genome nga gisusi sa mga imbestigador, duha ka protina sa CRISPR/Cas9 ang mogapos sa target nucleic acid sequence;sila nahimong duol, nga nagtugot sa intact nga luciferase nga protina sa pagporma ug pagpagawas sa asul nga kahayag sa presensya sa usa ka kemikal nga substrate..Sa pag-asoy sa substrate nga gigamit niini nga proseso, ang mga tigdukiduki migamit ug kontrol nga reaksyon nga nagpagawas ug berdeng kahayag.Ang usa ka tubo nga nag-usab sa kolor gikan sa berde ngadto sa asul nagpakita sa usa ka positibo nga resulta.
Gisulayan sa mga tigdukiduki ang ilang plataporma pinaagi sa pagpalambo sa RPA-LUNAS assay, nga nakamatikodSARS-CoV-2 RNAwalay kapoy nga RNA isolation, ug nagpakita sa iyang diagnostic performance sa nasopharyngeal swab samples gikan saCOVID 19mga pasyente.Ang RPA-LUNAS malampuson nga nakamatikod sa SARS-CoV-2 sulod sa 20 minutos sa mga sample nga adunay RNA viral load nga ubos sa 200 ka kopya/μL.
Ang mga tigdukiduki nagtuo nga ang ilang assay dali ug epektibo nga makit-an ang daghang uban pang mga virus."Ang RPA-LUNAS madanihon alang sa point-of-care nga makatakod nga pagsulay sa sakit," sila misulat.